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固相萃取技术原理与运用

发布时间:2021-05-20浏览:517

一般而言,分析仪器或分析方法的所谓“精密”,多指其测量的精密度(Precision)和准确度(Accuracy)。“精密度”是指数次测量结果的离散程度,也被俗称为结果的“平行性”、“重现性”。“准确度”是指测量结果和真值之间的偏离。在传统的测量误差概念中,精密度被认为主要反映了测量过程的偶然误差,准确度被认为主要反映了测量过程的系统误差。(注:本文中所述“术语”均为约定俗成的常用语,其准确定义,请以相关标准为准。)

在绝大多数情况下,我们发现,更为“精密“的方法或仪器对样品的前处理要求会相对更高。这种更高的要求主要表现为,一是要把样品处理得更干净,二是倾向于将待测目标物进一步浓缩。固相萃取技术(SPE)的兴起,正是跟随数十年来检测方法和仪器对样品处理的这些要求不断提升而逐渐发展起来的。

综合而言,SPE的分离原理与液相色谱分离原理如出一辙。所不同的是,液相色谱是连续流动相下的分配,SPE是间断“流动相”下的分配。而相同点在于,两者在热力学上,都是目标物(溶质)在固定相和流动相(溶剂)中的亲和能力不同而表现出“吸附”和“洗脱”的状态,进而实现不同目标物的“保留”和“分离”。

事实上,色谱保留-分离机理是多样性的,除了常见的亲酯-亲水分配的正、反相色谱(液-液和液-固色谱)之外,还有离子交换色谱、空间排阻色谱、亲和色谱等等。而且,绝大多数色谱分离过程中这些机理都是多种同时发生和作用的。

另一方面,目标物的理化属性也是SPE方法细节的又一决定性因素。实际工作中,实验室技术员在方法学开发中大多是从这里开始着手的。

通过对目标物理化属性的分析,首先确定适用于何种保留体系。例如对于中等极性的药物化合物,一般使用HLB为代表的萃取剂配合强极性溶剂水、甲醇、乙腈等,形成反相体系,进而也确定了吸附和洗脱的溶剂配比。进一步地,依据化合物酸碱性的强弱,决定是否同时适配离子交换体系。例如中等极性的碱性化合物,则通常使用HLB骨架的WCX萃取剂更为适合,于是吸附和洗脱的溶剂pH值也就一目了然了。

综上,一个“精密”的、“准确”的理化分析方法,势必对样品前处理的净化和浓缩有一定的要求。而SPE技术,因其本身对于检测目标物属性的选择性和通用性,并对色谱、质谱分析方法有着天然地适应性,最终成为目前最成熟的前处理手段之一。

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